Contribución de un factor nuclear kB y su sitio de unión para a la actividad humana de Promotor de angiotensinógeno en las células tubulares renales proximales

 Angiotensinógeno intrarrenal  (AGT) es altamente expresado en las células tubular proximal renal (RPTCs) y contribuye a la regulación de los niveles de angiotensina II intrarrenal. La inhibición del factor nuclear (NF)-kB suprimido en humanos la expresión de AGT en RPTCs humanos. Sin embargo, la presencia y la localización de un sitio de unión de NF-kB en la región promotora hAGT no se han determinado. Por lo tanto, este estudio se realizó para demostrar que un sitio de unión de NF-kB en la región promotora hAGT contribuye a hAGT actividad promotora en RPTCs humanos. La región promotora hAGT fue clonado -4358 a 122 y el análisis de supresión se realizó. Un posible NF-kBy su sitio de unión fue retirado de la región promotora hAGT  y mutado . RPTCs humanos fueron transfectadas, y la actividad hAGT promotor se determinó mediante el ensayo de la luciferasa. La identidad de las proteínas de unión al ADN de los ensayos de unión se determinó por Western blot.


http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3051182/?tool=pubmed

CNNM2, codifica una proteína requerida para el manejo basolateral renal de Mg2 + , y se encuentra mutado en la hipomagnesemia dominante

Se ha logrado generar ratones que carecen de claudina-16 para obtener información sobre las vías pertinentes para la perdida renal de Ca2+ y Mg 2+ . Cldn de 16 ratones deficientes muestran perdida renal de  Ca2 + y Mg 2 + , así como alteraciones en el transcriptoma renal como lo demuestra el análisis de microarrays. Algunos de los ARNm expresados ​​diferencialmente codifican proteínas conocidas por su participación en la manipulacion renal de Ca2 + y Mg 2 + , tales como el epitelio y sus canales de entrada de Ca2 + y Mg 2 + . Además, hemos identificado otras no, bien caracterizadas transcripciones irreguladas, uno de los cuales codifica CNNM2 (conocido como ACDP2) . La transcripción Cnnm2 capturado es de nuestro interés porque se ha demostrado estar aumentada en los ratones seguiendo una dieta baja en Mg 2 +  y en células de ratón cultivadas en DCT de baja Mg 2 + . Por otra parte, cuando se expresa en oocitos de Xenopus laevis, CNNM2 inducida por el transporte de una variedad de cationes bivalentes, como Mg 2 +, pero no Ca2 + .
En el presente estudio, se investigó CNNM2 (MIM 607803) como un gen candidato para el Mg 2 + en humanos sin resolver perder fenotipos y mutaciones identificadas en dos familias no relacionadas con hipomagnesemia dominante.



http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S000292971100053X

La clonación y caracterización preliminar de una proteína de unión al calcio estrechamente relacionado con nucleolina en la superficie apical de la recolección de células del interior del conducto medular

En el presente estudio, se analizaron las proteínas de la superficie medular del interior de los conductos colectores de la rata (IMCD) sus células y su capacidad para unirse al calcio iónico, los cristales de oxalato de calcio, y HA con alta afinidad. Se habla de una glicoproteína de superficie celular PNR, estrechamente relacionado con nucleolina y proponen que esta proteína juega un papel importante en la fijación de cristales en la enfermedad de cálculos renales. Nucleolina, la fosfoproteína nucleolar , tiene una masa molecular de aproximadamente 110 kDa y está considerado como un factor de transcripción de preribosomal síntesis de ARN. Al comienzo, fue localizado en una densa región del nucléolo, pero más tarde se encontró también en el citoplasma. Nucleolina o una proteína estrechamente relacionada con la que se ha demostrado en asociación con la membrana plasmática de algunas células, donde funciona como un receptor de las lipoproteínas, los virus, la matriz extracelular, factores de crecimiento y otras moléculas . Dependientes de calcio y sus propiedades de nucleolina o proteínas relacionadas con ella no se habla. En el presente estudio, se analiza la influencia del calcio en la distribución de los PNR(nucleolina proteina relacionada

http://www.jbc.org/content/274/39/27491.long).

Corrección de un defecto de la enzima en el tráfico de piedras renales hereditarias

En los  hepatocitos humanos normales, la enzima intermediario-metabólica alanina: glioxilato aminotransferasa (AGT) se encuentra dentro de los peroxisomas. Sin embargo,los pacientes que sufren de calculos del riñón hereditario. AGT resulta de la mala focalización de la interacción sinérgica entre el común P11L (Pro11 → Leu) polimorfismo y una enfermedad específica G170R mutación. El polimorfismo funcional genera una débil secuencia en las mitocondrias. Los dos cambios juntos, pero no de forma aislada, inhiben AGTdimerization, destacando los diferentes requisitos estructurales de los peroxisomas y las mitocondrias. En el presente estudio, se muestra que los tratamientos conocidos para aumentar la estabilidad de las proteínas de forma no específica  por completo a normalizar la focalización intracelular de los AGT mutante y expresar en células COS transfectadas.
Por otro lado, los tratamientos conocidos para disminuir la estabilidad de las proteínas  exacerban
el defecto de orientación. Ninguno de los tratamientos afecta a la relación de la eficiencia de las proteínas mitocondriales y peroxisomales de importación a las vías intrínseca.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1223567/pdf/12737622.pdf

TRPV5 polimorfismos del gen de la función renal hipercalciuria

El Receptor transitorio miembro potencial vaniloide 5 (TRPV5) constituye la proteína de entrada de calcio en el transporte renal de calcio transcelular. Se investigo en 20 pacientes con hipercalciuria renal . Para investigar la función del canal de la TRPV5 A8V-, R154H polimorfismos del gen y A561T, las mutaciones fueron preparados para  cada uno in vitro y clonado en el conejo homólogos de tipo salvaje de TRPV5.

La codificación de cDNA de longitud completa de tipo salvaje o mutado TRPV5 se han transfectadas en células HEK293.  TRPV5 polimorfismos de genes fueron identificados en pacientes con hipercalciuria renal que se han caracterizado y seleccionado  para poliuria concomitante o disminución de pH urinario, los síntomas que presenta el modelo nock-out TRPV5 ratón. El  Análisis electrofisiológico de una aberración genética de TRPV5 no implicó el polimorfismo A561T en la etiología de la insuficiencia renal hipercalciurica. TRPV5 no se puede descartar como un gen candidato para la hipercalciuria, como TRPV5 variantes de los genes podrían estar involucrados en la enfermedad.

http://ndt.oxfordjournals.org/content/24/6/1919.short